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  • 简介:摘要:目的:建立大肠杆菌表达重组蛋白外源性E.coli宿主残留DNA检测方法用于生产过程以及最终产品质量控制。方法:参考试剂盒相关说明书,样品加标回收了率无法达到2020版中国药典(Ch.P)第四部3407章节和美国药典(USP)1130章节要求,通过对药物浓度、处理温度、糖原蛋白酶K使用量以及不同加标量优化,即将样品稀释10倍后,加30pgE.coli标准品,20μl蛋白酶K消化1h,选择15μl PCR反应体系。结果:回收率满足在50%~150%之间。结论:借助商品化试剂盒,优化外源性DNA提取条件满足法规要求、操作简便,非常适用于大肠杆菌表达重组蛋白生产过程以及最终产品外源性残留DNA检测。

  • 标签: 大肠杆菌表达的重组蛋白 大肠杆菌 外源性DNA
  • 简介:干细胞因子(SCF)是一种与造血细胞、生殖细胞和色素细胞生长发育相关细胞因子。本研究利用pEX31B载体,在大肠杆菌中成功地表达重组人SCF融合蛋白。该融合蛋白以包涵体形式存在,约占菌体蛋白20%,经制备电泳纯化,纯度达90%以上,为制备人SCF单克隆抗体奠定了基础。

  • 标签: 干细胞因子 融合蛋白 表达
  • 简介:该病是由致病性大肠杆菌及其毒素引起一种暴发性、死亡率很高仔兔和幼兔肠道传染病,以水样腹泻或胶冻样粪便及严重脱水为特征传染病。如不及时诊治.势必造成大批死亡。河北省宁晋县耿庄桥乡郭某饲养600多只獭兔发生该病,经我院诊断与治疗,取得了满意效果,现报告如下。

  • 标签: 兔大肠杆菌病 致病性大肠杆菌 肠道传染病 水样腹泻 死亡率 暴发性
  • 简介:摘要:本研究主要探讨了温度对重组大肠杆菌生长及外源蛋白表达影响。在适宜温度范围内,大肠杆菌生长速率会随着温度升高而加快。过高温度会导致细菌生长受到抑制,同时也会影响外源蛋白表达。此外,低温可以改善外源蛋白稳定性和可溶性。本研究旨在为重组大肠杆菌优化培养提供理论参考,以期提高外源蛋白表达水平。

  • 标签: 重组大肠杆菌 温度 外源蛋白 表达水平
  • 简介:摘要目的探讨在大肠杆菌中HCV重组基因表达条件及临床应用。方法采用不同培养方式对含有丙肝炎症病毒E基因、C基因和NS基因进行重组表达,并将表达蛋白抗原进行提取、纯化,并采取一定操作对表达产物进行检测。结果经检测,重组表达物中含有特异性HCV抗原,对100份血清样本进行试验,其中50份为参比血清,其阴性检测符合率为96.0%,50分血清阳性检出率为92.0%。

  • 标签: HCV重组基因 大肠杆菌 丙型肝炎病毒
  • 简介:全世界每年有3500亿吨塑料被倒进垃圾堆,成为令人头疼巨大污染。现在好了,一种用大肠杆菌制造出新型塑料有可能拯救全世界白色污染。这项技术能让大肠杆菌吃掉谷物中糖分,将其变成制造塑料聚酯颗粒。这种新型塑料几乎和普通塑料一样结实,

  • 标签: 大肠杆菌 塑料袋 白色污染 全世界 垃圾堆 制造
  • 简介:摘要:肉鸡大肠杆菌病是由致病菌大肠杆菌引起一种疾病,其致病因素与养殖环境密切相关,对养禽业造成极大危害。致病性大肠杆菌有多种血清型,在临床实践中,大肠杆菌有许多血清型,不同血清型致病性差异很大。鸡肠炎大肠杆菌病容易在全年发生,任何年龄鸡都可以感染,不同年龄鸡感染大肠杆菌实际临床症状差异较大,容易在鸡群中广泛传播,病死率高,鸡群一旦发病很难完全控制。大肠杆菌可引起大肠杆菌败血症、肠炎、脐带心肌炎、心包炎、蛋黄腹膜炎、关节炎和肉芽肿等病症。在饲养鸡只各个环节,饲养者需要掌握相关专业知识和技术,充分了解肉鸡大肠杆菌发病因素和临床症状,及时准确地诊断疾病,采取有效方法预防和治疗肉鸡大肠杆菌病,同时需要避免滥用药物,以免造成大肠杆菌耐药性。

  • 标签: 肉鸡 大肠杆菌 防治要点
  • 简介:目的:在FUS-50L生物反应器中利用补料分批培养技术培养表达重组质粒pET28a(+)-GNLY大肠杆菌BL21(DE3)pLysS株,生产重组颗粒溶素(GNLY)。方法:选取含pET28a(+)-GNLYBL21(DE3)pLysS菌株单个克隆分级培养,将制备二级种子液接种于发酵罐中。在发酵过程中,控制溶氧为30%~50%,温度为37℃;在基础培养基内生长4h后,补加以甘油为碳源补料,继续生长到11h;加入葡萄糖至终浓度为1%,30℃诱导表达6h;收集菌体,纯化制备目的蛋白。利用Western印迹检测重组蛋白抗原性,用CFU方法检测其生物学活性。结果:发酵液中最终菌体密度达80g/L;纯化所得重组蛋白约占菌体总蛋白5%,含量为60mg/L;经鉴定所获重组颗粒溶素有较好免疫学活性和生物学活性。结论:用含重组质粒pET28a(+)-GNLY大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达系统,可得到具有生物活性重组颗粒溶素,为大批量生产提供了条件。

  • 标签: 颗粒溶素 分批补料 发酵培养 重组蛋白质
  • 简介:以pLF3为模板,PCR扩增得到葡聚糖酶启动子,并将启动子基因重新连接到切除启动子基因及葡聚糖酶基因pLF3载体上,构建pLF3-pro载体.采用PCR方法扩增朱黄青霉总DNAα-1-6-葡聚糖酶基因,并插入到pLF3-pro载体上,构建pLF3-Pro-Dex质粒,以大肠杆菌DH5α为宿主菌,酶切验证及PCR验证均表明成功构建了pLF3-Pro-Dex质粒,且重组质粒中α-1-6-葡聚糖酶基因与朱黄青霉中α-1-6-葡聚糖酶基因有93%同源性.

  • 标签: α-葡聚糖酶 朱黄青霉 表达 大肠杆菌
  • 简介:本区某粮食局养鸡场,雏鸡发生大批量死亡,经细菌学检验、动物试验诊断为雏鸡大肠杆菌病。一、发病情况1993年5月12号购进7800羽罗曼蛋鸡,13号(2日龄)即有鸡发病死亡,最多时14号一天死亡246只,13号—16号共死亡832只,至写稿之日仍继续死亡。二、临床症状大部分病鸡不显任何症状而突然死亡,少数病鸡呼吸困难,拉绿或黄绿稀便,1—2天即死亡。

  • 标签: 大肠杆菌病 罗曼蛋鸡 稀便 临床症状 细菌学检验 试验诊断
  • 简介:摘要随着我国社会经济不断发展,国家和居民对于食品安全关注也越来越高,近年来发生食品安全事故中,虽然有着很多新致病菌污染,但是从疾控系统数据来看,大肠杆菌污染依然是目前我国食品安全和疾病监控主要威胁。当前各个国家,大型微生物检测机构、微生物试剂公司都在不遗余力地开发更为快速、简便、可靠大肠杆菌检测方法和试剂,以推动大肠杆菌快速检测技术发展,本文就当前主要主流技术和新技术做一综述,以其为技术发展提供一点思路。

  • 标签: 食品安全 大肠杆菌 疾控监控
  • 简介:发病机制大肠杆菌首先入侵消化道,一般在宿主体内发生以下作用,导致机体发病。诊断结合发病日龄、有腹泻、排黄色稀便、发病率高、死亡率高、急性死亡等典型症状,可就仔猪黄痢做出初诊判断。

  • 标签: 大肠杆菌 仔猪 防治 发病机制 急性死亡 发病率
  • 简介:家兔大肠杆菌诊断夏家林(固始县畜牧兽医站)祝良慈(信阳市卫生防收站)河南省固始县某养兔场饲养580只西德长毛兔,于今年6月12日发病,发病率和死亡率很高。发病后兔场请我们作出诊断,现将家兔发病与诊断情况介绍如下:一、流行情况该兔场于今年6月12日...

  • 标签: 家兔大肠杆菌病 花生秧 实验室检查 病理解剖 硫酸庆大霉素 畜牧兽医站
  • 简介:犊牛大肠杆菌病,又称犊牛白痢,是由大肠杆菌引起初生犊牛急性型传染病。本病主要经消化道传染,危害哺乳初生犊牛,尤以未哺初乳7日龄内犊牛多发,死亡率很高,呈地方性流行。

  • 标签: 犊牛 大肠杆菌病 治疗 症状 急性型传染病
  • 简介:大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起禽类急性或慢性细菌性传染病,不同品种和不同Et龄鸡均可感染,幼雏和中年鸡对此病最易感染,且一年四季均可发生。但以冬、春季节较为多见。如果养殖密度过大、饲养笼具及环境消毒不彻底、场地环境污染严重,则该病随时均可发生。大肠杆菌是革兰氏阴性菌,是存在于人或动物肠道常在菌,鸡群可能由于环境变化发生应激或患病后免疫力下降诱发此病,如,日常饮食污染水源和垫料,或经呼吸道、消化道、蛋壳穿透、交配、污染输精管等感染都可诱发。临床症状及病理变化:发病鸡离群呆立、羽毛粗乱、消瘦,侵害呼吸道后出现呼吸困难;侵害眼睛后会出现眼前房肿胀;也可侵害关节,可造成关节炎和滑膜炎,排黄绿色稀粪。出现纤维素性心包炎和肝周炎,胸腔和腹腔内膜浑浊,有炎症,肠壁膜增厚,外观呈深红色。同时,鸡群会出现呼吸困难,发出哕音等。雏鸡大多出现肚子肿胀与脐炎,卵黄膜增厚,呈黄绿色,卵黄吸收不良,生长发育受阻,有的可能出现脑炎。产蛋鸡主要以出现坠卵性腹膜炎及输卵管炎,造成输卵管扩张,内有干酪样团块及恶臭渗出物为特征。

  • 标签: 鸡大肠杆菌病 致病性大肠杆菌 防治 细菌性传染病 环境污染 革兰氏阴性菌
  • 简介:鸡、火鸡、鸭、鹅等禽类都可感染,雏鸡易发,死亡率也高。饲养管理不善,往往引起该病发生.常与某些病并发或继发。积聚在肠道大肠杆菌可引起肠管充血.细菌产生毒索破坏肠壁,进入血液.造成一系列感染。粪便污染是主要传播方式.大肠杆菌随粪便排出,粪便干燥后随尘土飘散在空气中,通过呼吸道侵入健康禽体;被病禽粪便污染饲料、用具等也可以成为导致该病发生重要因素;禽蛋污染也是一个传播方式.禽蛋通过泄殖腔时,被含有致病性大肠杆菌肠道分泌物污染.蛋在窝里停留也可以污染.病原体可以进入蛋内.降低孵化率和雏禽质量。鸭蹼刺伤常使鸭群感染。该病一年四季均可发生。

  • 标签: 禽大肠杆菌病 粪便污染 致病性大肠杆菌
  • 简介:仔猪腹泻是制约猪场猪只成活率高低关键问题,其中以仔猪大肠杆菌病引起黄白痢和水肿病最为常见。本文介绍了仔猪大肠杆菌病发病诱因,临床症状及防治措施,以期对实际生产提供一些帮助。

  • 标签: 仔猪 仔猪黄痢 仔猪白痢 水肿病 防治
  • 简介:近几年,新疆生产建设兵团农二师养鹅业正朝着集约化、规模化、产业化方向迈进,养鹅已经成为农民脱贫致富奔小康重要途径之一。霍尔多巴吉鹅是由匈牙利霍尔多巴吉养殖股份有限公司历时20多年,在霍尔多巴吉草原上培育出来优质鹅品种,具有生产周期短、成本低适应性强,抗寒抗热,成活率高特点。作为肉绒两用品种,霍尔多巴吉鹅具有良好推广前景,在国际市场上颇具竞争力。农二师27团从2006至今陆续每年从内蒙古通辽引进匈牙利肉绒兼用型品种霍尔多巴吉鹅。

  • 标签: 大肠杆菌病 种鹅 新疆生产建设兵团 兼用型品种 防治 农民脱贫致富