简介:摘要目的在国内建立胰岛素自身抗体(IAA)的电化学发光检测法,并初步评价其应用价值。方法胰岛素原采用磺基吡啶钌衍生物(Sulfo-tag)和生物素标记后,与血清IAA孵育结合。Meso Scale Discovery(MSD)链霉亲和素电化学发光平板捕获标记的抗原抗体复合物后,采用MSD电化学发光仪进行检测,以IAA指数≥0.005作为阳性阈值。通过优化检测条件后,采用微量平板放射免疫法比较两种方法的相关性和一致性。选取2016至2018年于中南大学湘雅二医院代谢内分泌科门诊或住院的新诊断1型糖尿病(T1DM)患者(55例)及其一级亲属(216名),以及健康志愿者(健康对照组,413名)为研究对象,检测其血清样本,初步评价电化学发光法检测IAA的临床应用价值。结果优化条件包括:(1)生物素标记的胰岛素原和磺基吡啶钌衍生物标记的胰岛素原的最适浓度均为800 ng/ml;(2)酸化血清的方式为水浴30℃静置孵育45 min;(3)在反应体系中先加入35 μl稀释后的抗原,再加入15 μl Tris-HCl缓冲液,然后与酸化血清混匀孵育过夜能获得更高的信噪比(S/N)。电化学发光法间隔3个月重复检测22例样本,IAA指数差异无统计学意义(P=0.095),阴/阳性判定完全一致;与微量平板放射免疫法检测IAA的一致率为93.7%(119/127)(Kappa值为0.858),指数呈正相关(相关系数r=0.749,P<0.001)。电化学发光法受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.764(95%CI:0.669~0.858)。电化学发光法检测T1DM患者IAA的阳性率为52.73%(29/55),明显高于健康对照组的0.76%(2/263)(P<0.001);检测T1DM一级亲属组的阳性率为0.93%(2/216),与健康对照组相比差异无统计学意义(P=0.854)。结论电化学发光法检测IAA有较高的灵敏度和特异度,操作简便无放射污染,具有很好的临床应用价值。
简介:[目的]减少不同仪器间与运动员机能状态诊断相关的指标间的差异,保证实验室内不同检测系统间检测结果的一致性,为科研实验人员对运动员机能状态的监控和纵向跟踪研究提供准确数据,通过案例应用使实验人员能够合理正确运用Bland-Altman分析法解决一致性评价问题。[方法]分别使用ACCESS1和ACCESS2全自动化学发光免疫分析仪,随机选择的77例男性和60例女性的血清检测睾酮值,138例血清检测皮质醇值。使用Medcalc16.4.3医学统计软件对数据进行整理和统计分析,作出BA图和获得计算结果。参照临床实验室TEA可接受范围来确定检测结果一致性。[结果]两种机器测量女性睾酮结果数据行为良好,但在B-A分析中的一致性区间的上下限值不满足临床要求,两台仪器检测女性睾酮值不具有一致性;两台机器测量其余项目数据行为不良,不适宜应用Bland-Altman法进行一致性评价。[结论]Bland-Altman分析法在实际应用中对数据情况还存在诸多要求,评价方法自身的系统性和全面性还有待完善,专业领域使用该方法来进行一致性评价还需慎重。
简介:摘要:根据当前生活医疗技术的不断发展,生物制药技术也愈发先进,酶是一种特异性的生物催化剂,在日常生活中常应用于食品、纺织、医药、造纸等各方面。酶的应用不断加强,使酶制剂的应用不断扩大,给许多行业带来了积极的影响。但是目前在我国一些行业在对于酶制剂的应用上还是出现一些问题。
简介:摘要目的对比传统的洗板方法和市场目前通行的洗板方法的优劣,观察两种方法哪种对酶联免疫的质量控制更加精确。方法在酶联免疫质量控制中,出现了很多没有与反应中抗原抗体相结合的物质和在反应过程中与载体非特异性结合的物质。为了除去反应中的这些物质,在酶联反应的质量控制中通常采用洗涤的方法。结果酶联免疫的质量控制需要经过加样、孵育、洗涤、显色、比色五个步骤,在实际临床应用中,若酶联反应的质量控制不好,可能会引起医疗事故,甚至会引发医疗纠纷。结论在实验室洗涤操作过程中,需要保证各孔中的洗涤剂都被完全充分吸干,必要时需要人工扣板。最后一次洗涤一定要保证彻底清洁,否则会导致空白值,影响酶联免疫质量控制的精确性。
简介:摘要:无论任何教学模式都不是一成不变的,而是需要随着教育理念的革新不断演变。在新课改深入推进的背景下,教学目标发生了极大的变化,其中一个十分重要的表现就是更加关注学生的课堂主体地位。基于这一要求,组织探究活动的必要性逐渐突显出来。尤其是在化学这样一门自然学科中,探究活动更是具有至关重要的意义。为此,笔者将结合自身的教学实践经验,阐述组织初中化学探究活动的必要性以及主要策略,以期能够为学生综合化学素养的提升提供一定的参考意义。
简介:一天夜里,天下着小雨,我撑着伞走在路上。因为天太黑,没看见路上有一块香蕉皮,滑了一跤。后来我就想:"要是伞能发光该多好啊,既能照亮道路,又能让过往的车辆注意到行人。"我把这个想法告诉了科学老师,老师很赞成。于是,我暗暗下定决心,一定要发明一把会发光的雨伞。