简介：摘要研究表明玫瑰痤疮与炎症因子、神经脉管功能、微生态环境等多种因素有关。JAK-STAT信号通路涉及多种炎症细胞因子，在细胞增殖、分化、凋亡和血管生成及免疫调节等方面发挥重要作用。本文将概述JAK-STAT信号通路并探讨其在玫瑰痤疮中的潜在作用。

简介：摘要炎症性肠病（IBD）是一种慢性非特异性肠道炎症性疾病，发病机制不明。部分IBD患者对常规药物治疗反应不佳。目前认为哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）可通过PI3K/AKT/mTOR、TLR4/MAPK/mTOR和AMPK/mTOR等多种机制影响肠道自噬和炎症过程，从而影响疾病的发生发展过程。通过靶向mTOR信号通路可为IBD的治疗提供新的可能。本文就mTOR信号通路在IBD中的作用机制以及靶向mTOR信号通路治疗IBD进行总结。

简介：摘要目的探讨脂多糖（LPS）诱导的O-连接的N-乙酰葡萄糖胺（O-GlcNAc）修饰是否参与内皮细胞炎症信号通路。方法体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC），取对数生长期细胞用于实验，分为空白对照组、LPS组（2 000 mg/L的LPS）、O-GlcNAc转移酶（OGT）过表达（OGT-OE）+LPS组（转染OGT-OE质粒+2 000 mg/L的LPS）、蛋白激酶C（PKC）抑制剂+LPS组（10 μmol/L的Go 6983+2 000 mg/L的LPS）、Rho蛋白家族RhoA抑制剂+ LPS组（40 μmol/L盐酸罗红+ 2 000 mg/L的LPS）、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）抑制剂+LPS组（1 μmol/L的SL-2052+2 000 mg/L的LPS）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）抑制剂+ LPS组（10 μmol/L的PP2+2 000 mg/L的LPS）和小干扰RNA（siRNA）作用的Akt（si-AKT）+LPS组（si-Akt+2 000 mg/L的LPS）。各组细胞经LPS处理24 h后，采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测炎症细胞因子〔白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）〕的转录水平；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）测定OGT、O-GlcNAc、Akt、细胞外信号调节激酶（ERK）、p38丝裂素活化蛋白激酶（p38MAPK）、核转录因子-κB p65（NF-κB p65）和信号转导及转录激活因子3（STAT3）的蛋白表达或磷酸化水平。结果与空白对照组相比，LPS组细胞中OGT表达及O-GlcNAc修饰水平均降低，并伴随ERK、p38MAPK和STAT3的磷酸化水平升高，且炎症因子的转录水平亦显著升高〔IL-6 mRNA（2-ΔΔCt）：4.71±0.60比1.03±0.29，TNF-α mRNA（2-ΔΔCt）：1.89±0.11比1.04±0.35，ICAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：2.06±0.18比1.02±0.21，VCAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：2.94±0.57比1.01±0.17，均P<0.05〕，说明LPS会导致O-GlcNAc修饰水平降低、炎症信号通路激活及炎症因子表达升高。与LPS组相比，OGT-OE+LPS组细胞ERK、p38MAPK、NF-κB p65和STAT3磷酸化水平下降，伴随炎症因子表达显著下降〔IL-6 mRNA（2-ΔΔCt）：0.12±0.01比0.90±0.17，TNF-α mRNA（2-ΔΔCt）：0.31±0.01比0.91±0.14，ICAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：0.64±0.02比1.13±0.16，VCAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：0.11±0.01比0.93±0.11，均P<0.05〕，说明OGT水平增高可抑制LPS作用下的内皮细胞炎症信号通路部分激活。与空白对照组比较，LPS组Akt磷酸化水平升高；与LPS组相比，给予PKC抑制剂、RhoA抑制剂、PI3K抑制剂和Akt抑制剂预处理后，OGT表达及O-GlcNAc修饰水平均下调；其中PP2+LPS组IL-6、TNF-α、ICAM-1的转录水平均较LPS组明显下降〔IL-6 mRNA（2-ΔΔCt）：1.46±0.16比3.55±0.87，TNF-α mRNA（2-ΔΔCt）：0.98±0.14比1.76±0.10，ICAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：1.39±0.24比2.04±0.13，均P<0.05〕，而VCAM-1无明显变化。与LPS组相比，si-Akt+LPS组OGT表达及O-GlcNAc修饰水平均下降，且炎症因子的转录水平亦明显下调〔IL-6 mRNA（2-ΔΔCt）：0.75±0.03比0.99±0.09，TNF-α mRNA（2-ΔΔCt）：0.69±0.01比1.10±0.08，ICAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：0.76±0.01比0.99±0.02，VCAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：0.93±0.08比1.20±0.21，均P<0.05〕，说明Akt参与了LPS对OGT的作用过程，并影响了炎症因子表达。结论LPS作用下的内皮细胞O-GlcNAc修饰水平下降，促进了炎症信号通路部分激活，主要涉及ERK、p38MAPK和STAT3，并影响了炎症因子表达；Akt可能参与了LPS对O-GlcNAc修饰的抑制作用。

简介：摘要目的评价胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在血管钠肽(VNP)减轻大鼠肝缺血再灌注损伤中的作用。方法将20只体重200~250 g的健康雄性SD大鼠分为4组：假手术组(S组)、肝缺血再灌注组(I/R组)、VNP组(V组)、PD98059+VNP组(P+V组)，每组5只。大鼠肝热缺血再灌注模型采用动脉夹夹闭肝左叶和肝中叶的肝动脉和门静脉45 min，然后再灌注120 min。V组于缺血前10 min注射VNP，P+V组在给予VNP前20 min注射PD98059，再行VNP给药和缺血再灌注处理。检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量，以及肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量；观察肝组织病理学变化；采用蛋白印迹法测定磷酸化的ERK (p-ERK)1/2蛋白含量。结果与S组相比，I/R组和P+V组血清ALT[(489.65±11.22)、(333.05±24.77)比(33.78±4.88)U/L]、AST[(651.43±14.99)、(503.18±21.48)比(154.84±12.32)U/L]、TNF-α[(12.83±1.09)、(9.64±0.57)比(2.11±0.11)ng/L]、IL-1β[(7.19±0.62)、(5.12±0.22) 比(1.10±0.49)ng/L]、肝组织匀浆MDA[(8.00±0.88)、(5.60±1.01)比(2.76±1.29)μmol/mg]升高，而SOD [(54.89±10.60)、(68.85±8.33)比(126.10±15.63)nmol/mg]降低，差异具有统计学意义(均P<0.05)。与I/R组相比，V组大鼠血清ALT、AST、TNF-α及IL-1β均降低，差异有统计学意义(均P<0.05)。组织病理学显示，I/R组与P+V组肝组织结构损伤明显加重。与I/R组相比，V组p-ERK1/2蛋白表达增高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论VNP可减轻大鼠肝缺血再灌注损伤，其机制可能与激活p-ERK1/2信号通路减轻肝细胞炎症反应有关。

简介：摘要目的基于Notch信号通路探讨矾冰纳米乳对增生性瘢痕模型大鼠VEGF、TGF-β1的影响。方法将144只SD大鼠按照随机数字表法分为空白对照组、模型组、曲安奈德组及矾冰纳米乳组低、中、高剂量组，每组24只。除空白对照组外，其余各组大鼠制备深Ⅱ°烧伤增生性瘢痕模型。造模成功后24 h，模型组给予等量生理盐水外涂，矾冰纳米乳组低、中、高剂量组大鼠分别外涂矾冰纳米乳8.15、6.30、32.60 mg/ml，曲安奈德组外涂曲安奈德，2次/d，每次0.2 ml，连续给药35 d。分别在第14、21、28、35天，采用VG染色计算胶原纤维面密度；采用Western blot检测VEGF、TGF-β1、Notch1、Jagged1蛋白表达；采用RT-PCR检测Notch1、Jagged1 mRNA表达。结果与模型组比较，曲安奈德组与矾冰纳米乳各剂量组胶原纤维面密度降低（P<0.05），VEGF、TGF-β1、Notch1、Jagged1蛋白及Notch1、Jagged1 mRNA水平降低（P<0.05）。与曲安奈德组比较，中剂量组胶原纤维面密度、VEGF、TGF-β1、Notch1、Jagged1蛋白及Notch1、Jagged1 mRNA水平降低（P<0.05）。结论矾冰纳米乳抑制增生性瘢痕形成的作用机制与下调Notch信号通路相关分子Notch1、Jagged1蛋白及mRNA水平，进而下调VEGF、TGF-β1蛋白表达有关。

简介：摘要目的探讨绞股蓝皂苷ⅩⅦ调控核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件（Nrf2/ARE）信号通路抗脑缺血/再灌注（I/R）的机制。方法将40只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、I/R模型组及25、50和100 mg/kg绞股蓝皂苷ⅩⅦ组，每组8只。绞股蓝皂苷ⅩⅦ组分别给予绞股蓝皂苷ⅩⅦ 25、50、100 mg/kg灌胃（灌胃量0.01 mL/g），连续给药14 d；其余两组给予相同剂量生理盐水灌胃。然后采用改良线栓法制备大鼠脑I/R模型；假手术组大鼠采用相同方法手术，但不产生实质性栓塞。再灌注后24 h，评估各组大鼠神经功能缺损评分；采集大鼠腹主动脉全血检测血清活性氧（ROS）、血红素加氧酶-1（HO-1）、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）、超氧化物歧化酶（SOD）、醌NADH氧化还原酶1（NQO1）、丙二醛（MDA）水平；随后取完整大脑组织并分离大脑皮质脑梗死周围半暗带组织，观察大鼠脑组织大体情况及脑梗死体积，光镜下观察脑组织病理学变化，采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测脑缺血半暗带组织Nrf2和Keap1的mRNA表达，采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测脑缺血半暗带组织Nrf2和Keap1的蛋白表达。结果再灌注后24 h，与假手术组比较，I/R模型组大鼠神经功能缺损评分明显升高，脑组织梗死体积明显增大，血清NQO1、SOD和γ-GCS水平均明显降低、血清MDA、HO-1和ROS水平均明显升高，脑缺血半暗带组织Nrf2和Keap1的mRNA及蛋白表达均明显升高。与I/R模型组比较，50 mg/kg与100 mg/kg绞股蓝皂苷ⅩⅦ能明显降低脑I/R大鼠的神经功能缺损评分（分：1.50±0.53、1.37±0.52比2.75±0.46），缩小脑组织梗死体积〔（19.8±5.1）%、（21.4±6.4）%比（42.3±5.8）%〕，明显提高血清NQO1、SOD、HO-1和γ-GCS水平〔NQO1（ng/L）：186.05±10.38、220.75±16.22比131.36±5.95，SOD（kU/L）：63.23±5.30、72.70±8.62比36.75±6.55，HO-1（ng/L）：60.57±7.93、60.35±4.72比42.72±4.95，γ-GCS（kU/L）：8.81±0.53、8.72±0.69比6.80±0.56〕，明显降低血清MDA和ROS水平〔MDA（μmol/L）：5.94±0.66、5.61±0.53比10.88±1.34，ROS（kU/L）：69.11±4.23、67.12±4.52比104.43±7.54〕，同时可明显提高脑缺血半暗带组织Nrf2和Keap1的mRNA及蛋白表达〔Nrf2 mRNA（2-△△Ct）：1.90±0.13、2.13±0.18比1.48±0.11，Keap1 mRNA（2-△△Ct）：1.78±0.11、1.85±0.10比1.43±0.10，Nrf2/β-actin：0.73±0.04、0.79±0.03比0.60±0.03，Keap1/β-actin：0.71±0.01、0.76±0.03比0.61±0.01〕，比较差异均有统计学意义（均P<0.01）；25 mg/kg绞股蓝皂苷ⅩⅦ无明显作用。结论绞股蓝皂苷ⅩⅦ （50 mg/kg和100 mg/kg）可能通过Nrf2/ARE信号通路调节NQO1、SOD、HO-1、γ-GCS、ROS及MDA起到抗脑I/R损伤的作用。

简介：摘要增生性玻璃体视网膜病变（PVR）是发生在视网膜上的无血管纤维增生性疾病，主要病理改变为视网膜色素上皮细胞（RPE）及胶质细胞在玻璃体和视网膜上增殖和牵拉。基础研究证实PVR的形成和多条信号通路有关，主要包括NF-κB信号通路，MAPK及其下游信号通路，JAK/STAT信号通路，PI3K/Akt信号通路，凝血酶及其受体通路，TGF-β及下游信号通路，North信号通路及Wnt/β-连环蛋白信号通路等。本文总结了PVR形成机制中的主要信号通路的研究进展，为PVR药物治疗研究提供依据和支持。

简介：摘要创面愈合是一个缓慢而复杂的生物学过程，包括炎症反应、细胞增殖分化和迁移、血管新生、细胞外基质沉积和组织重塑等。Wnt信号通路可分为经典通路和非经典通路，其中Wnt经典通路又称Wnt/β连环蛋白信号通路，其在细胞分化、迁移和组织稳态维持过程中发挥重要作用。许多炎症因子、生长因子等都参与该通路的上游调控。Wnt/β连环蛋白信号通路的激活在皮肤创面的发生、发展、再生、修复及相关治疗的过程中，起到了重要作用。该文综述了Wnt/β连环蛋白信号通路与创面愈合的关系，并总结了其对炎症反应、细胞增殖、血管新生、毛囊再生和皮肤纤维化等创面愈合重要过程的影响以及Wnt信号通路抑制因子在创面愈合中的作用。

简介：摘要目的探讨前列腺癌、癌旁前列腺组织以及正常前列腺增生组织中Hedgehog(Hh)信号通路相关因子Shh、Ptch1、Gli1 mRNA的表达及意义。方法选择2017年2月至2019年2月本院收治的42例前列腺癌患者作为研究对象，设为观察组。所有患者均拟手术治疗，术中取癌组织与癌旁组织(距离病灶≥3 cm)；选择同期手术治疗的39例前列腺增生患者的手术标本，设为对照组。利用免疫组化和qRT-PCR技术检测前列腺增生、前列腺癌和癌旁组织中Hh信号通路相关因子Shh、Ptch1和Gli1蛋白及mRNA的表达情况，分析比较Hh信号通路在前列腺增生、前列腺癌和癌旁组织中表达的差异及其机制。结果观察组的癌旁组织与对照组的Shh、Ptch1和Gli1蛋白阳性率比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)；观察组的癌组织中Shh、Ptch1和Gli1蛋白阳性率均高于对照组(均P<0.05)。观察组的癌旁组织与对照组的Shh、Ptch1和Gli1 mRNA表达水平比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)；观察组的癌组织中Shh、Ptch1和Gli1 mRNA表达水平均高于观察组的癌旁组织和对照组(均P<0.05)；Spearman秩相关系数结果显示，Hh信号通路中Shh、Ptch1和Gli1与术前前列腺特异抗原(PSA)均无相关性(均P>0.05)；与Gleason评分、临床分期、病理分级均呈正相关性(均P<0.05)。结论Hh信号通路中Shh、Ptch1和Gli1在前列腺癌患者中呈高表达，其在前列腺癌疾病的发生发展中可能起到一定的作用。

简介：摘要肝癌（liver cancer，LC）是最常见的致命恶性肿瘤，而早期不易被发现、难诊断，是其高致死率的主要原因。转录因子7样2（transcription factor 7 like 2，TCF7L2）是Wnt/β连环蛋白（β-catenin）信号通路的转录因子，β-catenin对TCF7L2的激活具有直接调控作用。在肝发育和肝再生阶段，激活Wnt/β-catenin信号通路可促进肝组织的生成。然而，在正常的成熟肝细胞中，β-catenin活性被抑制。肝损伤和肝癌激活β-catenin对TCF7L2的转录功能活化，诱导肝损伤因子和促肝癌因子的表达，且TCF7L2的表达与肝癌的发生和进展呈正相关。TCF7L2是一个潜在的肝癌诊断及治疗靶点。

简介：摘要目的分析Toll样受体(TLRs)/核因子κB(NF-κB)信号通路及T淋巴细胞与重症肺炎患者预后的关系。方法本研究为病例对照研究。采用非随机抽样的方法选取2019年1月至2022年5月合肥市第二人民医院收治的90例重症肺炎患者。根据入院28 d存活与否分为存活组(67例)与死亡组(23例)。比较2组患者入院24 h内外周血单个核细胞TLR4蛋白、NF-κB蛋白、磷酸化κB抑制蛋白(p-IκB)表达情况及炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)]水平，并分析2组患者入院24 h内T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+表达情况。绘制受试者工作特性(ROC)曲线评价TLRs/NF-κB信号通路相关蛋白及炎症因子、T淋巴细胞对重症肺炎患者28 d死亡风险的预测效能。结果存活组外周血单个核细胞TLR4蛋白、NF-κB蛋白、p-IκB蛋白表达及IL-6、TNF-α、CRP水平均低于死亡组，分别为TLR4蛋白(0.59±0.16)比(0.67±0.15)、NF-κB蛋白(0.57±0.15)比(0.65±0.13)、p-IκB蛋白(0.55±0.12)比(0.62±0.13)、IL-6(34.60±8.20)比(40.19±8.54)、TNF-α(32.62±8.19)比(37.10±8.57)、CRP(13.24±4.21)比(18.58±5.46)，差异均有统计学意义(t值分别为2.10、2.28、2.36、2.79、2.24、4.85，均P<0.05)。存活组T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+表达均高于死亡组[(61.78±5.69)%比(57.12±5.19)%、(31.58±4.47)%比(27.76±4.23)%，t值分别为3.46、3.58，均P<0.05]；2组T淋巴细胞亚群CD8+表达差异无统计学意义[(29.01±3.63)%比(30.69±3.50)%，t＝1.93，P＝0.057)。ROC曲线结果显示，外周血单个核细胞TLR4蛋白、NF-κB蛋白、p-IκB蛋白及IL-6、TNF-α、CRP和T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+对重症肺炎患者28 d死亡风险均有一定预测效能，曲线下面积分别为0.825、0.815、0.811、0.712、0.776、0.728、0.732和0.713。结论重症肺炎患者存在TLRs/NF-κB信号通路异常激活、炎性反应强烈和免疫功能紊乱情况。外周血单个核细胞TLR4蛋白、NF-κB蛋白、p-IκB蛋白及IL-6、TNF-α、CRP和T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+对重症肺炎患者预后均具有较好的预测效能。

简介：摘要缺血性脑卒中的发生发展机制目前尚未完全阐明，但炎症损伤已被公认在其中起着重要作用。Toll样受体4(TLR4)相关信号通路的激活可促进缺血性脑卒中后相关促炎细胞因子和抗炎细胞因子的表达，从而影响着缺血性脑卒中的进展及预后。笔者现围绕TLR4相关信号通路在缺血性脑卒中炎症损伤中的研究进展进行综述，以期为可用于缺血性脑卒中治疗的靶向TLR4抗炎药物的研发提供一些思路及借鉴。

简介：摘要目的探讨沉默信息调节子1（SIRT1）能否调控核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1（Nrf2/HO-1）信号通路，以及在脓毒症大鼠急性肺损伤（ALI）中的作用。方法将24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿孔术（CLP）致脓毒症模型组（CLP组）、脓毒症+SIRT1特异性激动剂组（CLP+SRT1720组，术前2 h腹腔注射SRT1720 10 mg/kg）、脓毒症+SIRT1特异性抑制剂组（CLP+EX527组，术前2 h腹腔注射EX527 10 mg/kg），每组6只。制模后24 h处死大鼠取肺组织，并进行肺组织病理评分（Smith评分），检测肺组织超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL-6、IL-1β）以及SIRT1、Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达。结果与Sham组相比，CLP组肺泡结构受损、肺泡间隔增宽、炎症细胞浸润、肺毛细血管充血，Smith评分显著升高；肺组织炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平均明显升高，SOD活性及GSH含量降低，MDA及8-OHdG含量升高；肺组织SIRT1、Nrf2和HO-1的mRNA及蛋白表达降低。使用SIRT1特异性激动剂后，CLP+SRT1720组较CLP组肺组织损伤得到明显缓解，Smith评分及肺组织TNF-α、IL-6、IL-1β水平明显下降〔Smith评分（分）：2.83±0.75比5.67±0.52，TNF-α（ng/L）：36.78±5.36比66.99±5.44，IL-6（ng/L）：23.97±3.76比45.70±4.16，IL-1β（ng/L）：16.76±1.39比39.64±2.59，均P<0.05〕，SOD活性及GSH含量升高〔SOD（kU/g）：115.88±3.31比101.65±1.09，GSH（μmol/g）：8.42±0.81比5.74±0.46，均P<0.05〕，MDA及8-OHdG含量降低〔MDA（μmol/g）：5.24±0.33比9.86±0.66，8-OHdG（ng/L）：405.76±8.54比647.12±10.64，均P<0.05〕，肺组织SIRT1、Nrf2和HO-1的mRNA及蛋白表达明显升高〔SIRT1 mRNA（2-ΔΔCT）：1.49±0.15比0.64±0.03，Nrf2 mRNA（2-ΔΔCT）：1.19±0.08比0.84±0.02，HO-1 mRNA（2-ΔΔCT）：1.80±0.41比0.64±0.11，SIRT1蛋白（SIRT1/β-actin）：1.03±0.06比0.52±0.05，Nrf2蛋白（Nrf2/β-actin）：1.14±0.10比0.63±0.05，HO-1蛋白（HO-1/β-actin）：1.01±0.11比0.73±0.03，均P<0.05〕。而使用SIRT1特异性抑制剂后，CLP+EX527组较CLP组肺组织损伤明显加重，Smith评分及肺组织TNF-α、IL-6、IL-1β水平明显升高〔Smith评分（分）：8.00±0.89比5.67±0.52，TNF-α（ng/L）：87.15±4.23比66.99±5.44，IL-6（ng/L）：66.79±2.93比45.70±4.16，IL-1β（ng/L）：58.99±2.12比39.64±2.59，均P<0.05〕，SOD活性及GSH含量降低〔SOD（kU/g）：72.84±3.85比101.65±1.09，GSH（μmol/g）：3.30±0.67比5.74±0.46，均P<0.05〕，MDA及8-OHdG含量升高〔MDA（μmol/g）：14.14±0.70比9.86±0.66，8-OHdG（ng/L）：927.66±11.47比647.12±10.64，均P<0.05〕，肺组织SIRT1、Nrf2和HO-1的mRNA及蛋白表达明显降低〔SIRT1 mRNA（2-ΔΔCT）：0.40±0.07比0.64±0.03，Nrf2 mRNA（2-ΔΔCT）：0.48±0.07比0.84±0.02，HO-1 mRNA（2-ΔΔCT）：0.27±0.14比0.64±0.11，SIRT1蛋白（SIRT1/β-actin）：0.20±0.05比0.52±0.05，Nrf2蛋白（Nrf2/β-actin）：0.45±0.01比0.63±0.05，HO-1蛋白（HO-1/β-actin）：0.36±0.08比0.73±0.03，均P<0.05〕。结论在脓毒症ALI大鼠模型中，可通过激活SIRT1调控Nrf2/HO-1信号通路活化，上调下游抗氧化酶的表达，减少氧化应激损伤，进而减轻脓毒症诱导的ALI。

简介：摘要目的观察HO-1/CO/PPAR-γ信号通路在小鼠动静脉内瘘内膜增生病理损害中的变化规律。方法选取雄性野生型小鼠随机分为模型组及对照组，每组18只。应用显微外科技术建立小鼠颈动静脉内瘘模型(模型组)，对照组仅做手术切口缝合。术后21天使用过量戊巴比妥钠处死小鼠，获取血液及病理标本。应用全自动生化分析仪检测血清中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、脂蛋白α、总胆红素水平；HE染色检测血管壁变化；应用分子染色方法对标记的活性氧(reactive oxygen species，ROS)进行检测；应用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)测定目标基因血红素加氧酶-1(heme oxygenase，HO-1)、过氧化物酶增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferators-activated receptors-γ，PPAR-γ)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-9，MMP-9)的mRNA水平；应用Western blot法测定目标基因HO-1、PPAR-γ及MMP-9的蛋白表达；应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法测定HO-1/CO/PPAR-γ信号通路下游因子转化生长因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)、白细胞介素(interleukin，IL)-1β、IL-8表达水平。结果模型组小鼠血清中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和总胆红素较对照组明显降低，差异具有统计学意义[mmol/L：(3.45±0.32)比(4.03±0.16)，(1.62±0.42)比(2.06±0.35)，(3.87±0.30)比(5.11±0.26)，(0.45±0.04)比(0.65±0.09)，(11.28±1.73)比(13.47±0.87)，t值分别为－6.88、－3.41、－13.25、－8.62和－4.80，P值均<0.05]。HE染色提示，模型组小鼠静脉壁内膜厚度较对照组明显增厚，血管壁中活性氧ROS水平较对照组明显升高，差异具有统计学意义[EU/mg：(99.11±6.34)比(89.71±8.41)，t＝3.79，P<0.05]。与对照组相比，模型组小鼠HO-1/CO/PPAR-γ信号通路目标基因及蛋白HO-1、PPAR-γ 、MMP-9 mRNA表达明显升高，差异具有统计学意义[目标基因：(1.02±0.69)比(7.17±2.16) ，(0.96±0.04)比(6.75±0.24) ，(0.61±0.35)比(1.02±0.03) ，t值分别为11.51、100.96和4.95，P值均<0.05；目标蛋白：(0.07±0.02)比(0.41±0.01) ，(0.27±0.04)比(0.35±0.05) ，(0.12±0.02)比(0.45±0.08) ，t值分别为81.43、5.19和17.39，P值均<0.05]。与对照组相比，模型组小鼠HO-1/CO/PPAR-γ信号通路下游炎性因子TGF-β、IL-1β、IL-8分泌明显升高，差异有统计学意义[pg/mL：(3.52±2.92)比(27.46±2.70) ，(16.78±0.60)比(38.54±2.53) ，(35.20±1.95)比(101.71±7.75) ，t值分别为25.53、35.55和35.31，P值均<0.05]。结论HO-1/CO/PPAR信号通路参与了小鼠动静脉内瘘血管内膜增生发生发展过程，并通过提高目标基因、目标蛋白的表达水平，增强相关炎性因子的释放等途径保护内膜功能，减轻血管的损伤。

简介：摘要目的研究芍药苷(paeoniflorin, PF)对链脲佐菌素(streptozocin, STZ)合并卵巢切除(ovariectomized, OVX)小鼠toll样受体4(TLR4)/核转录因子(NF-κB)炎症信号通路的影响，探讨其是否改善去卵巢糖尿病小鼠认知障碍(diabetes cognitive impairment，DCI)。方法取90只C57BL/6J雌性小鼠，分为对照组(SHAM组)、卵巢切除组(OVX组)、糖尿病组(连续5天腹腔注射STZ 50 mg·kg－1·d－1，DM组)、双模型组(DM造模合并OVX手术，O+D组)、芍药苷低剂量干预组(OVX+STZ+L-PF 50 mg·kg－1·d－1，L-PF组)、芍药苷高剂量干预组(OVX+STZ+H-PF 100 mg·kg－1·d－1，H-PF组)，每组15只。芍药苷干预8周后，行为学实验(水迷宫实验及Y迷宫实验)测定小鼠认知功能；HE及Nissl染色观察小鼠海马组织病理变化；实时荧光定量PCR检测海马组织TLR4、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)mRNA表达；Western blot检测TLR4、NF-κB(p65)、TNF-α、IL-6、IL-1β、β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein，Aβ)、tau蛋白、p-tau蛋白的表达。结果与SHAM组相比，OVX组、DM组、O+D组学习记忆能力下降，海马组织细胞损伤，相关基因mRNA及蛋白表达上调，其中O+D组最严重；对比O+D组，PF干预可减缓小鼠学习记忆障碍，改善认知功能，减轻小鼠海马组织损伤，下调相关因子mRNA及蛋白表达水平，其中H-PF组效果更明显。结论PF通过抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路，改善去卵巢糖尿病小鼠认知功能障碍。

简介：摘要目的观察无机砷中毒大鼠肝组织中Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4）信号通路相关蛋白及其磷酸化蛋白表达水平，探讨TLR4介导的炎症信号通路在砷致肝纤维化损伤中的作用。方法将健康初断乳SD大鼠18只，按体重（80 ~ 100 g）采用随机数字表法分为3组，每组6只，雌雄各半。对照组给予10 ml/kg生理盐水灌胃；亚砷酸钠（NaAsO2）染毒组给予10 mg/kg NaAsO2灌胃；TAK-242干预组给予10 mg/kg NaAsO2灌胃，12周后同时给予0.5 mg/kg TLR4抑制剂TAK-242腹腔注射。每周给药6 d，持续36周。实验结束后采集各组大鼠肝组织和血清，HE、Masson染色法光镜下观察肝组织病理学及胶原纤维沉积情况；全自动生化分析仪检测血清肝功能指标丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）含量；蛋白质印迹法检测大鼠肝组织纤维化蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、波形蛋白（Vimentin）表达水平及TLR4信号通路相关蛋白TLR4，核转录因子κB（NF-κB）-p65亚基（p65）、NF-κB-p50亚基（p50）及其磷酸化蛋白p-p65、p-p50表达水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肝组织炎症因子白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-10分泌水平。结果HE、Masson染色结果显示，与对照组比较，NaAsO2染毒组出现明显的炎性细胞浸润、肝细胞坏死及胶原纤维沉积，而TAK-242干预组炎性细胞浸润情况较NaAsO2染毒组有所改善，并且胶原纤维沉积减少。血清肝功能指标ALT、AST、ALP含量检测结果显示，NaAsO2染毒组均高于对照组，而TAK-242干预组均低于NaAsO2染毒组（均P < 0.05）。蛋白质印迹法检测结果显示，NaAsO2染毒组大鼠肝组织纤维化蛋白α-SMA、TGF-β1、Vimentin（1.04 ± 0.19、0.92 ± 0.14、1.20 ± 0.21），TLR4信号通路相关蛋白及其磷酸化蛋白TLR4、p50、p-p50、p-p65表达水平（1.16 ± 0.21、0.95 ± 0.16、1.24 ± 0.23、1.56 ± 0.25）均高于对照组（0.44 ± 0.08、0.42 ± 0.08、0.72 ± 0.07，0.69 ± 0.15、0.71 ± 0.11、0.46 ± 0.07、0.54 ± 0.11，均P < 0.05），TAK-242干预组（0.60 ± 0.13、0.59 ± 0.16、0.49 ± 0.11，0.47 ± 0.08、0.86 ± 0.09、0.79 ± 0.14、1.02 ± 0.17）表达水平均低于NaAsO2染毒组（均P < 0.05）；p65表达水平3组间比较，差异无统计学意义（F = 14.29，P = 0.053）。ELISA检测结果显示，NaAsO2染毒组大鼠肝组织IL-6、TNF-α分泌水平[（98.89 ± 4.58）、（83.25 ± 4.57）ng/g]均高于对照组[（27.30 ± 3.92）、（27.77 ± 1.83）ng/g，均P < 0.05]，而IL-10分泌水平[（36.88 ± 3.86）ng/g]低于对照组[（77.96 ± 7.87）ng/g，P < 0.05]；TAK-242干预组与NaAsO2染毒组比较，IL-6、TNF-α分泌水平[（44.32 ± 3.60）、（36.51 ± 2.93）ng/g]均较低，IL-10分泌水平[（60.40 ± 4.94）ng/g]较高（均P < 0.05）。结论TLR4介导的炎症信号通路相关蛋白及其磷酸化蛋白在无机砷暴露大鼠肝组织中均高表达，抑制TLR4信号通路可明显减轻无机砷致大鼠肝纤维化损伤程度。

简介：摘要目的探讨成纤维细胞生长因子10(FGF10)对神经元损伤的保护作用及其潜在的分子机制。方法剥离新生SD乳鼠的脑组织并提取其中的皮层神经元，将其种植于含L-多聚赖氨酸的孔板上进行培养，并分为正常组、髓鞘碎片组和髓鞘碎片+FGF10组，其中髓鞘碎片组神经元在培养4 h后添加一定含量的髓鞘碎片溶液(终浓度为10 μg/mL)，而髓鞘碎片+FGF10组神经元同时在培养基内添加髓鞘碎片和FGF10溶液(终浓度为4.3 nmol/L)。培养1周后，应用TUNEL染色、流式细胞术检测各组神经元的凋亡情况，应用活/死细胞染色、CCK-8法检测各组神经元的生存情况，应用Western blotting、免疫荧光双标染色检测各组神经元内凋亡相关蛋白、微管相关蛋白和RAS同源基因家族成员A(Rho A)/Rho A相关蛋白激酶(ROCK)信号通路相关蛋白的表达。结果与正常组相比，髓鞘碎片组中TUNEL染色所示神经元凋亡率明显升高，流式细胞术所示早期神经元凋亡率明显升高，活化半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)蛋白表达明显升高，Bcl-2/Bax值明显降低，活/死细胞染色所示神经元死亡率明显升高，CCK-8法所示神经元生存率明显降低，乙酰化微管蛋白/酪氨酸微管蛋白(Ace/Tyr-tubulin)值明显降低，Tau蛋白表达明显降低，Ace/Tyr-tubulin荧光强度比值明显降低，Rho A、ROCK蛋白表达明显升高，Rho A荧光强度值明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。与髓鞘碎片组相比，髓鞘碎片+FGF10组中TUNEL染色所示神经元凋亡率明显降低，流式细胞术所示早期神经元凋亡率明显降低，活化caspase-3蛋白表达明显降低，Bcl-2/Bax值明显升高，活/死细胞染色所示神经元死亡率明显降低，CCK-8法所示神经元生存率明显升高，Ace/Tyr-tubulin值明显升高，Tau蛋白表达明显升高，Ace/Tyr-tubulin荧光强度比值明显升高，Rho A、ROCK蛋白表达明显降低，Rho A荧光强度值明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论FGF10可能通过抑制Rho A/ROCK信号通路进而促进神经元内微管稳定，从而对抗神经元在髓鞘碎片环境下发生的凋亡并提高其生存率。

简介：摘要目的观察腺嘌呤诱导的慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）大鼠模型中血管生成素样蛋白4（angiopoietin-like protein 4，ANGPTL4）信号通路的表达，并探讨该通路在CKD肾纤维化中的作用。方法36只雄性SD大鼠随机分为对照组（生理盐水灌胃，n=15）和CKD组（2.5%腺嘌呤250 mg·kg-1·d-1灌胃，n=21），于第1、2、4周末各组随机选取5只，检测肾功能及24 h尿蛋白量，HE和Masson染色观察肾脏病理改变，免疫组化和实时荧光定量PCR检测肾脏组织缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）、ANGPTL4、骨形成蛋白7（bone morphogenetic protein 7，BMP7）、Smad1、α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）及Ⅰ型胶原蛋白（typeⅠcollagen，Col-Ⅰ）的蛋白和mRNA表达。采用Pearson相关分析法分析各指标间的相关性。结果（1）与对照组相比，CKD组血清肌酐和血尿素氮水平在第1、2、4周末均明显较高，24 h尿蛋白量在第2、4周末均显著较高（均P < 0.05）。（2）HE和Masson染色发现，与对照组相比，CKD组在第1、2、4周末可见明显的肾结构紊乱及胶原纤维沉积，并随时间进展加重。（3）免疫组化和实时荧光定量PCR结果提示，与对照组相比，CKD组第1、2、4周末ANGPTL4、α-SMA、Col-Ⅰ蛋白和mRNA表达均较高，而第1、2、4周末BMP7、Smad1蛋白和mRNA表达均较低，第2、4周末HIF-1α蛋白和mRNA表达均较高（均P < 0.05）。（4）相关性分析结果显示，HIF-1α、ANGPTL4 mRNA表达与α-SMA mRNA均呈正相关（r=0.919，P < 0.001；r=0.757，P < 0.001），与Col-ⅠmRNA表达也呈正相关（r=0.925，P < 0.001；r=0.777，P < 0.001）；HIF-1α mRNA表达与ANGPTL4 mRNA表达呈正相关（r=0.766，P < 0.001）；HIF-1α、ANGPTL4 mRNA表达与BMP7 mRNA均呈负相关（r=-0.652，P < 0.001；r=-0.741，P < 0.001）。结论腺嘌呤诱导的CKD大鼠模型中可能存在ANGPTL4信号通路的激活，且该通路可能参与CKD肾纤维化的进程。

简介：摘要目的探讨氢吗啡酮（hydromorphone, HM）对大鼠脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion injury, CIRI）的保护作用及其对钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶β（calmodulin-dependent protein kinase kinase β, Ca MMKβ）和核因子E2相关因子2（nuclear factor-E2 related factor2, Nrf2）/血红素氧合酶1（heme oxygenase-1, HO-1）信号通路表达的影响。方法选择雄性SD大鼠54只，采用随机数字表法分为3组（每组18只）：假手术组（Sham组）、脑缺血再灌注组（IR组）、脑缺血再灌注+HM组（HM组）。IR组参照改良Longa线栓法建立大鼠CIRI模型，HM组在IR组的基础上尾静脉注射5 mg/kg HM，Sham组不插线栓（其余同IR组）。记录3组大鼠麻醉清醒后神经行为学评分，测定大鼠脑梗死面积，检测脑组织中氧化应激因子活性氧（reactive oxygen species, ROS）含量、丙二醛（malondialdehyde, MDA）浓度、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）活性及TNF-α和IL-1β浓度，大鼠脑组织制成石蜡切片进行免疫组化染色检测Ca MMKβ表达量，Western blot法检测脑组织中Nrf2和HO-1蛋白水平。结果IR组和HM组大鼠神经行为学评分和脑梗死面积百分比明显高于Sham组，且HM组明显低于IR组（P<0.05）。IR组和HM组大鼠脑组织ROS含量、MDA浓度及TNF-α和IL-1β浓度明显高于Sham组，且HM组明显低于IR组（P<0.05），IR组和HM组大鼠脑组织SOD活性、Ca MMKβ表达量及Nrf2和HO-1蛋白水平明显低于Sham组，且HM组明显高于IR组（P<0.05）。结论HM可能通过上调CIRI大鼠Ca MMKβ表达及Nrf2/HO-1通路，抑制氧化应激及炎症反应，发挥脑组织保护作用。

简介：摘要目的探讨LncRNA-MEG3及Rac1/Cdc42/PAK1信号通路在先天性巨结肠(Hirschsprung disease，HSCR)发病机制中的作用及机制。方法收集2016年1月至2018年12月在遵义医科大学附属医院病理确诊HSCR并手术治疗的患儿结肠组织标本30例为实验组(HSCR组)，其中男23例，女7例；年龄为(18.86±1.78)个月；体重为(4.56±0.19)kg。收集非先天性消化道畸形、非肠神经相关疾病手术切除肠管患儿14例组织标本为对照组(Normal组)，包括坏死性小肠结肠炎、嵌顿疝和肠套叠造瘘患儿在闭瘘手术时吻合处正常肠管，其中男10例，女4例；年龄为(16.73±1.03)个月，体重为(5.01±0.20)kg。采用qRT-PCR和Western blot检测HSCR组与Normal组中MEG3和Rac1/Cdc42/PAK1信号通路各蛋白的表达水平。在SH-SY5Y细胞中通过转染MEG3过表达质粒以及加入通路抑制剂AZA1构建细胞模型，并分为4组：①空白对照组(Control组)，仅有SH-SY5Y细胞；②空载体组(pcDNA3.1组)，SH-SY5Y细胞+pcDNA3.1质粒；③MEG3过表达组(MEG3组)，SH-SY5Y细胞+pcDNA3.1-MEG3质粒；④抑制剂组(MEG3+AZA1组)，SH-SY5Y细胞+pcDNA3.1-MEG3+AZA1抑制剂。采用Western blot、CCK-8和Transwell方法检测各组细胞中Rac1、Cdc42、PAK1及P-PAK1蛋白表达量以及细胞增殖和迁移能力。两组间数据在进行方差同质性检验后采用两独立样本t检验比较，多组数据之间的比较采用单因素方差分析。若总体方差不齐，采用修正的界限值或Tamhane's T2检验；非正态分布的计量资料，采用多独立样本比较的秩和检验。结果HSCR患儿狭窄段肠管组织中MEG3、Rac1、Cdc42、PAK1和P-PAK1蛋白表达量均较Normal组低(Rac1：0.20±0.05比0.78±0.05，t＝8.37；Cdc42：0.38±0.08比1.03±0.08，t＝5.68；PAK1：0.27±0.02比1.10±0.06，t＝13.52；P-PAK1：0.24±0.03比1.07±0.06，t＝12.99；P均<0.01)；在细胞模型中，MEG3组细胞中Rac1、Cdc42、PAK1和P-PAK1蛋白相对表达量均高于Control组和MEG3+AZA1组(Rac1：0.96±0.05比0.36±0.11比0.75±0.20，F＝3.46，P<0.05；Cdc42：1.12±0.08比0.53±0.19比0.68±0.10，F＝5.37，P<0.01；PAK1：1.02±0.09比0.55±0.14比0.47±0.14，F＝5.60，P<0.05；P-PAK1：0.97±0.07比0.66±0.08比0.47±0.03，F＝15.66，P<0.05)，MEG3组细胞中MEG3表达量明显高于Control组和pcDNA3.1组(1.00±0.20比0.14±0.04比0.02±0.01，F＝20.56，P<0.01)，Control组和pcDNA3.1组中MEG3相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。MEG3组细胞增殖能力高于Control组及MEG3+AZA1组(12 h：0.19±0.00比0.19±0.00比0.18±0.00，P>0.05；24 h：0.21±0.00比0.19±0.01比0.17±0.00，F＝12.00，P<0.01；48 h：0.30±0.02比0.26±0.00比0.22±0.01，F＝9.60，P<0.05)。MEG3组细胞迁徙数量明显高于Control组(141.67±11.93比96.33±8.02，t＝3.15，P<0.05)，MEG3+AZA1组细胞迁徙数量低于MEG3组和Control组(71.00±7.00比141.67±11.93比96.33±8.02，F＝15.04，P<0.01)。结论低表达的MEG3可能通过调控Rac1/Cdc42/PAK1信号通路抑制神经嵴细胞增殖和迁移能力，可能与HSCR发生有关。