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  • 简介:摘要为探讨聚合链反应(PCR)DNA扩增对诊断活动性肺结核的临床价值,本文用PCR技术扩增结核杆菌特有的MPB64蛋白基因序列,对121例病人临床标本进行检测,发现34例活动性肺结核中有28例PCR阳性,疑诊为肺结核者33例中有18例阳性,非结核肺疾患54例中有10例阳性,其中有肺结核既往史者阳性6例,有结核接触史者阳性3例。提示PCR阳性并非为活动性肺结核所特有。

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  • 简介:摘要目的研究比较免疫荧光与聚合链(PCR)法在淋球菌感染的临床应用价值。方法随机选取本院自2009年至2012年就诊的淋球菌感染的尿道炎患者126名,分为两组,观察组采用免疫荧光定量与PCR法,对照组则采用常规涂片染色法,进行比较两组的阳性检出率。结果126名患者中,免疫荧光PCR法62例的阳性检出率为85.5%;涂片法64阳性检出率为54.7%,免疫荧光PCR法的阳性检出率明显高于常规涂片法。结论免疫荧光PCR法优于图片染色法,并具有敏感性强,快速、特异性高等特点1,在临床诊断上有显著效果,对临床诊断与治疗有着重要的指导意义。

  • 标签: 免疫荧光 聚合酶链(PCR) 淋球菌 尿道炎
  • 简介:目的建立针对脆性X综合征FMR1基因CGG重复数的快速产前检测技术方法,用于基于人群的筛查。方法采用荧光PCR法对356名孕妇进行产前FMR1基因CGG重复数检测。结果本方法可检测CGG重复数小于130的携带者,共275例(77.25%)毛细管电泳结果显示为2组峰,提示为杂合型基因型,可明确诊断。81例(22.75%)仅见到一组峰,提示可能为纯合子,也可能为CGG重复数高于130的携带者。结论基于荧光PCR的检测技术,临床上可实现近80%孕妇FMR1基因CGG重复数精确、快速的初筛,剩余病例的明确诊断尚需其他技术辅助。

  • 标签: 脆性X染色体综合征 FMR1基因 产前检测 荧光聚合酶链反应
  • 简介:目的:从海参体壁组织中分离提取蛋白体,研究其学性质。方法:新鲜海参组织经匀浆、Tris-HCl缓冲液浸提后得到粗提物,再经(NH4)2SO4盐析、二乙氨乙基葡聚糖纤维素和丙烯葡聚糖凝胶S-300分离纯化后得到海参蛋白体。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,其分子质量200ku。结果:海参蛋白体特异性最强的检测底物Boc-GAA-MCA,最适pH8.0,最适反应温度45℃。40℃时蛋白体活性稳定,在1h的孵育过程中呈现一定的热激活效应。在50~60℃,活力随孵育时间的延长迅速下降。K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+均可明显抑制其活性。抗痛素、N-甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基化酮、N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮及E-64均可显著抑制该蛋白体活性。结论:海参体壁蛋白体具有典型的蛋白体的复合型活性,其中胰蛋白样活性较强,之后是糜蛋白样活性,而肽基谷氨酰肽水解样活性最弱。

  • 标签: 海参 蛋白酶体 纯化 酶学性质
  • 简介:[目的]研究在卒中易感型自发性高血压大鼠(stroke-pronespontaneouslyhypertensiverat,SHR-SP)肾脏中,基质金属蛋白(Matrixmetalloproteinases,MMPs)-2,-9以及组织型基质金属蛋白抑制剂(tissueinhibitorsofmatrixmetalloproteinases,TIMPs)-1,-2的表达与活性的变化.[方法]分别采用40只7周龄雄性SHR-SP大鼠及10只同周龄雄性Wistar-Kyoto大鼠作为高血压组与阴性对照组.观察期间定期测量各组大鼠无创鼠尾压.6个月后,处死存活大鼠留取血液及肾脏标本,测定血清肌酐及尿素氮浓度,采用组织病理染色观察两组大鼠肾脏组织学改变,采用明胶谱法分析存活大鼠肾脏MMP-2和MMP-9蛋白活性,并采用逆明胶谱法及蛋白质印迹分析TIMP-1和TIMP-2蛋白表达和活性.[结果](1)明胶谱分析显示:SHR-SP肾脏中MMP-2活性较WKY组明显增高[(3.28±1.17)vs.(1.26±0.62);P<0.01].(2)逆明胶谱分析显示:高血压大鼠肾脏TIMP-2的活性明显高于WKY组[(1.12±0.43)vs.(0.78±0.34),P<0.05].(3)蛋白质印迹结果显示:高血压组大鼠肾脏TIMP-1、TIMP-2表达较对照组高[(TIMP-1:(3.44±0.13)vs.(2.31±0.15),TIMP-2:(6.44±0.49)vs.(4.94±0.68),P<0.01].[结论]SHR-SP肾脏组织中MMP-2及TIMP-2的活性增高,TIMP-1及TIMP-2的表达均明显升高.

  • 标签: 高血压 基质金属蛋白酶 组织型基质金属蛋白酶抑制剂 肾纤维化
  • 简介:摘要产IgA蛋白的细菌在危及生命的感染中占有很大比例,IgA蛋白可以裂解IgA,并使细菌免受各种免疫球蛋白的攻击,在感染中具有多种作用。IgA的糖基化异常影响其对IgA蛋白的敏感性,因此在最常见的肾小球肾炎IgAN中,IgA的糖基化异常可能为导致IgA升高的原因之一。本文就各种细菌产生的IgA蛋白的基因结构,性质及应用作一综述。

  • 标签: IgA蛋白酶 细菌 IgAN
  • 简介:摘要目的观察注射用丹参粉针伍注射用糜蛋白粉针对产科会阴侧切口感染时的治疗效果。选择产科会阴侧切切口感染患者23例为实验组,以丹参粉针伍糜蛋白局部治疗,治疗时间4~7日。对照组13例常规处置换药、抗生素冲洗治疗,治疗时间10~25日。实验组明显低于对照组(P<0.01)。结论丹参伍糜蛋白能明显缩短产科会阴侧切口感染治疗时间。

  • 标签: 丹参 糜蛋白酶 会阴侧切口感染
  • 简介:通过检测尿液样本中的某些指标诊断膀胱肿瘤是目前研究的一个热点,作者采用相关技术验证了一系列具有一定临床应用价值的膀胱肿瘤标志物。在本文中介绍4种潜在的无创诊断膀胱肿瘤的标志物。作者总共检测124例患者的尿液样本,其中63例确诊为膀胱肿瘤,61例为正常对照。

  • 标签: Α1-抗胰蛋白酶 无创诊断 膀胱癌 载脂蛋白E 肿瘤标志物 膀胱肿瘤
  • 简介:目的:构建含解耦联蛋白2(UCP2)-3’非翻译区(UTR)序列的野生型和突变型质粒的双荧光素报告基因载体.探讨微小RNA(miR)-15b对UCP2基因表达的调控作用。方法:应用生物信息软件预测miR-15b的靶基因,分别将预测靶基因UCP2的3’UTR及其突变体克隆到荧光素载体DsiCHECK-2骨架中,构建UCP2野生型和突变型质粒。并采用测序方法鉴定DsiCHECK-2-UCP2载体是否构建成功。将UCP2野生型和突变型质粒分别与miR-15b模拟物、miR-15b模拟物正常对照、miR-15b抑制剂、miR-15b抑制剂正常对照在293T细胞中共转染。通过双荧光素报告基因检测分析miR-15b对UCP2基因表达的调控作用。结果:测序鉴定证实psiCHECK-2-UCP2双荧光素报告基因载体构建成功。双荧光素报告基因检测显示转染UCP2野生型和UCP2突变型报告基因的293T细胞过表达miR-15b后,UCP2野生型报告基因的荧光素活性明显下降.下调31%(P=0.003),过表达miR-15b抑制剂后,UCP2野生型报告基因的荧光素活性明显增加,上调46%(P=0.01)。而miR-15b模拟物、miR-15b模拟物正常对照、miR-15b抑制剂、miR-15b抑制剂正常对照对UCP2突变型的表达均无明显影响(P〉0.05)。结论:UCP2是miR-15b直接作用的靶基因,且miR-15b结合于UCP2基因3’UTR区域.转录后水平对UCP2有直接的抑制作用。

  • 标签: 解耦联蛋白2 微小RNA-15b 双荧光素酶报告基因
  • 简介:摘要目的比较探讨肝硬化患者血清前白蛋白(TPA)、白蛋白(ALB)、总胆汁酸(TBA)和胆碱酯(CHE)在评价肝功能损害程度上变化水平的临床意义。方法检测136例肝硬化患者和80例健康对照者血清中TPA、ALB、TBA和CHE水平。结果随肝硬化Child-Pugh分级的逐级递增,TPA、ALB和CHE水平逐级明显降低,TBA逐级明显升高,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论血清TPA、ALB、TBA和CHE变化水平对肝硬化患者在临床上的病情诊断、疗效观察和预后判断具有重要的指导意义。

  • 标签: 肝硬化 前白蛋白 白蛋白 总胆汁酸 胆碱酯酶
  • 简介:摘要目的探讨尿蛋白结合尿(NAG)检测在早期药源性肾损害临床诊断中的意义。方法收集近年来在我院检验科进行尿蛋白和尿(NAG)测定的89例临床资料,其中发生药源性肾损害的46例为A组,健康体检者43例为正常对照B组。尿蛋白检测采用干化法,尿(NAG)检测采用终点比色法。结果肾损害A组中尿白蛋白检出阳性率71.7%,尿(NAG)检出阳性率78.3%,两项指标联合检测中至少有一项及以上阳性的检出阳性率91.3%,肾损害A组阳性检出率远高于健康对照B组(P<0.01)。结论尿蛋白检测简单、实用,尿(NAG)检测可靠性高,二者结合对于诊断早期药源性肾损害非常有价值。

  • 标签: 药源性肾损害 尿蛋白检测 尿酶检测
  • 简介:目的研究低氧状态下乙酰肝素(heparanase,Hpa)反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynu—cleotide,AS—ODN)对胰腺癌高转移细胞株MIAPaCa-2细胞基质金属蛋白.2(matrixmetalloproteinase.2,MMP-2)和MMP-9的影响。方法以HpaAS—ODN预先阻断MIAPaCa-2细胞Hpa表达并低氧培养,观察MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白表达的变化,明胶法检测MMP-2和MMP-9活性的变化,观察阻断Hpa对MMP-2和MMP-9表达及活性的影响。结果低氧培养条件下,MIAPaCa-2细胞MMP-2mRNA及蛋白表达略有上调,但是与常氧条件下培养对比,在6、12和24h差异均无统计学意义(P值均〉0.05)。以ASODN阻断Hpa后,MMP-2mRNA及蛋白表达均无明显变化。低氧后6hMMP-9mRNA及蛋白表达开始升高,12h(P〈0.05)和24h(P〈0.01)更加明显。阻断Hpa表达后,MMP-9mRNA及蛋白表达在各时间段均有下降,而在24h下降明显,差异具有统计学意义(P〈0.01)。低氧后12h和24h,活化型的MMP-2和MMP-9均显著增强,当Hpa表达被抑制后,于12h(P〈0.01)和24h(P〈0.01)活化型的MMP-9活性受到明显抑制,而各时间内,活化型的MMP-2活性均不受HpaAS—ODN的影响(P〉0.05)。结论低氧可刺激MIAPaCa-2细胞MMP-9mRNA及蛋白的表达,增强活性。预先阻断Hpa表达在12h和24h可抑制MMP-9mRNA和蛋白的表达,降低MMP-9的活性,而对MMP-2则无明显影响。

  • 标签: 胰腺癌 乙酰肝素酶 基质金属蛋白酶 寡核苷酸类 反义
  • 简介:摘要目的探究尿微量蛋白与尿检测在急性肾炎恢复期的意义。方法对在2013年6月到2013年11月期间在我院进行急性肾炎患者210例,其中有89例在调查时处于恢复期为研究组,完全康复患者进行复查的71例为对照组,对两组患者的尿微量白蛋白mALB和NAG进行测定,并对其值分析。结果对照组患者的mALB检测值和NAG(尿)的检测值进行比较,研究组患者的检测值高于对照组,且有差异(P<0.05),研究组患者的检测值的阳性率分别是mALB41%,NAG32%,NAG与mALB联合检测阳性率为48.7%。结论尿微量蛋白和尿的联合检测可以敏感地诊断急性肾炎恢复期肾脏损害,给临床准确评价治疗效果,预测其预后。即尿微量蛋白联合尿检测诊断肾脏疾病具有较高的价值,值得临床上广泛应用。

  • 标签: 尿微量蛋白 尿酶 急性肾衰
  • 简介:

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  • 简介:摘要作为一种生物催化剂具有高效、高选择性、催化反应条件温和、无污染等特点,在食品、医药和化工等产业中的得到了广泛认同。近年来,的固定化技术的发展使游离不稳定和易变性等缺点得以克服。本实验通过利用包埋-交联法将胰蛋白固定化,在不同频率的电刺激下,分析交变电场对固定化胰蛋白催化活性的影响。研究表明包埋-交联法固定化胰蛋白性能较理想,在交变电场下固定化的胰蛋白催化苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE)时,不同频率下的吸光度有明显变化,说明改变反应体系所在的交变电场频率可以改变固定化胰蛋白的活性。

  • 标签: 胰蛋白酶 固定化 催化活性 交变电场
  • 简介:摘要森林脑炎是林区的一种病毒性传染病,是以蜱为传播媒介的中枢神经系统感染性疾病,致病原为森林脑炎病毒,血清中基质金属蛋白-9(MMP-9)可做为判定森林脑炎所致的中枢神经系统损害严重程度的有效方法。本文对森林脑炎与MMP-9的关系进行简单介绍,为森林脑炎的诊断及治疗提供参考。

  • 标签: 森林脑炎 基质金属蛋白酶-9 关系
  • 简介:摘要目的对在乳腺癌中膜型基质金属蛋白-1(MT1-MMP)蛋白表达的临床意义进行评价分析。方法随机抽取我院收治的乳腺癌临床患者病例58例作为研究对象,对其采取免疫组化法展开膜型基质金属蛋白-1蛋白检测,并回顾分析检测结果。结果本组58例患者中,膜型基质金属蛋白-1蛋白表达阳性者32例,阳性率为55.17%。且不同临床分期阳性率差异显著(P<0.05)。结论MT1-MMP的表达率同乳腺癌肿瘤分期、大小以及淋巴结转移之间存在明显的关系,值得关注。

  • 标签: 乳腺癌 膜型基质金属蛋白酶-1 分期 淋巴结转移
  • 简介:摘要目的研究基质金属蛋白抑制基因RECK在子宫内膜癌组织中和正常子宫内膜中如何表达及其意义。方法选取沈阳市妇婴医院2009年1月~2012年12月41例子宫内膜癌患者行广泛子宫切除术的标本石蜡切片和同期20例子宫脱垂患者手术切除的正常子宫内膜标本石蜡切片,对组织RECK采用免疫组织化学法检测。结果1、RECK表达在细胞膜表达,内膜癌组织中RECK阳性表达率为53.6%;对照组RECK阳性表达率为80%,差别有显著性意义(P<0.05)。2、Ⅰ期的子宫内膜癌组织中RECK的表达阳性率明显高Ⅲ期(P<0.05),Ⅱ期与Ⅰ期比较无显著性差异(P>0.05)。Ⅱ期与Ⅲ差别有显著性差异(P<0.05);子宫浅肌层浸润者RECK表达阳性率高于深肌层浸润者(P<0.05);子宫内膜癌病理分级间RECK表达差别无显著性意义;RECK在有淋巴转移和无淋巴转移组间比较差别有显著性意义(P<0.05)。结论1、RECK在正常子宫内膜中广泛表达,在子宫内膜癌组织中表达明显降低或不表达。2、RECK可抑制子宫内膜癌的发生、浸润和转移。

  • 标签: 基质金属蛋白酶抑制基因 RECK 子宫内膜癌
  • 简介:摘要目的通过对误诊嗜酸性胃肠炎病例分析,提高对本病认识。方法通过文献内容检索,找出误诊原因。结果和结论嗜酸性胃肠炎临床表现无特异性,易误诊。外周血、组织活检、腹水嗜酸性粒细胞多是诊断的重要资料。

  • 标签: 嗜酸粒细胞性胃肠炎 误诊 腹水