简介:【摘要】《全日制义务教育思想品德课程标准(实验稿)》指出:“在教学中积极引导学生自主学习、主动探索社会现实与自我成长的问题,通过调查、讨论、访谈等活动,在合作和分享中丰富、扩展自己的经验,不断激发道德学习的愿望,提升自我成长的需求。”根据课程标准,作为一线教师的我们需要在课堂教学中开展有效的、优化的合作学习模式。本文将对此问题展开深度探讨,从构建合作学习模式的意义出发,解析当前合作模式存在的问题,继而展望此学习模式的具体实践与创新。
简介:摘要目的探讨长链非编码RNA同源盒基因A11反义RNA(HOXA11-AS)在脑胶质瘤中的表达及生物学功能。方法首先分析HOXA11-AS在癌症基因组图谱(TCGA)计划数据库(689例)的低级别脑胶质瘤、胶质母细胞瘤以及GTEx数据库(255例)的正常脑组织样本中的表达情况。基于TCGA数据库,进一步分析HOXA11-AS在世界卫生组织(WHO)Ⅱ~Ⅳ级的脑胶质瘤样本中的表达情况。根据HOXA11-AS表达量的中位数分为高表达组和低表达组,并绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用log-rank检验比较HOXA11-AS低表达组与高表达组脑胶质瘤患者的生存差异。进一步的体外实验以人星形胶质细胞为对照组,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)实验验证HOXA11-AS在脑胶质瘤U251、U87及LN229细胞株中的表达。U87和LN229细胞株中分别使用携带HOXA11-AS cDNA序列的过表达慢病毒载体构建过表达HOXA11-AS的细胞株,使用空载慢病毒载体构建对照细胞株。U87和LN229细胞株中分别使用siRNA转染敲低HOXA11-AS的表达。进一步通过EdU增殖实验、细胞划痕实验和Transwell实验研究HOXA11-AS对胶质瘤细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响。结果HOXA11-AS在正常脑组织、低级别脑胶质瘤及胶质母细胞瘤中表达量的差异具有统计学意义(P<0.001)。TCGA数据库中,WHO Ⅲ、Ⅳ级脑胶质瘤的HOXA11-AS表达量均高于Ⅱ级脑胶质瘤(P<0.001)。全级别脑胶质瘤患者中,HOXA11-AS高表达组(n=344)的总生存期短于低表达组(n=345,P<0.001)。进一步的体外实验中,qRT-PCR检测结果显示,与对照组比较,U87组、LN229组及U251组HOXA11-AS的表达均升高(均P<0.001)。U87和LN229过表达组HOXA11-AS的表达均较其对照组上调(均P<0.001)。U87敲低组、LN229敲低组的HOXA11-AS表达均较其对照组下调(均P<0.001)。EdU增殖实验结果显示,U87和LN229过表达组的EdU阳性率分别高于U87和LN229对照组(均P<0.05);相反,U87敲低组较U87无义序列组、LN229敲低组较LN229无义序列组的EdU阳性率均下降(均P<0.001)。细胞划痕实验结果显示,U87和LN229过表达组的细胞迁移率分别高于U87和LN229对照组(均P<0.05);相反,U87敲低组较U87无义序列组、LN229敲低组较LN229无义序列组的细胞迁移率均下降(均P<0.001)。Transwell实验结果显示,U87和LN229过表达组的穿胶细胞数分别多于U87对照组和LN229对照组(均P<0.05);相反,U87敲低组较U87无义序列组、LN229敲低组较LN229无义序列组的穿胶细胞数均低(均P<0.05)。结论HOXA11-AS在脑胶质瘤中呈高表达,并可促进胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。
简介:摘要目的探究LncRNA抗分化非编码RNA(anti-differetiation non-coding RNA, ANCR)在胃癌患者肿瘤组织中表达的临床意义及其对细胞的生物学效应。方法收集宁波医疗中心李惠利医院东部院区2016年9月至2018年6月胃癌组织及相应癌旁组织标本各72例,同时培养胃癌细胞HGC-27,慢病毒转染ANCR cDNA全长载体于HGC-27细胞中作为实验组,并转染空白载体作为对照组;实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测组织或细胞中ANCR、转录因子Oct4及Sox2 mRNA的表达水平,免疫印迹实验(western blot)检测细胞中Oct4及Sox2蛋白表达水平,CCK-8实验检测两组细胞增殖能力,Transwell侵袭及迁移实验检测两组细胞转移能力。结果胃癌组织及癌旁组织中ANCR表达分别为0.013(0.006,0.025)及0.041(0.011,0.136),胃癌组织中ANCR表达显著高于癌旁组织(P<0.01),且高表达ANCR的患者TNM分期更高及细胞分化程度更低(χ2=7.414、8.236,P<0.05)。对照组及实验组细胞ANCR mRNA表达分别为(1.000±0.064)、(6.250±0.889),Oct4 mRNA表达分别为(1.000±0.208)、(2.815±0.349),Sox2 mRNA表达分别为(1.000±0.173)、(2.526±0.390),Oct4蛋白表达分别为(1.000±0.148)、(3.396±0.105),Sox2蛋白表达分别为(1.000±0.119)、(2.916±0.130),实验组细胞ANCR、Oct4、Sox2 mRNA表达显著高于对照组(P<0.01),实验组细胞Oct4、Sox2蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.01)。对照组及实验组细胞72h的相对增殖能力分别为(7.164±0.426)、(9.627±0.605);96h的相对增殖能力分别为(13.750±1.089)、(19.166±1.649),实验组细胞72 h、96 h的增殖能力显著高于对照组(P<0.01)。对照组及实验组每视野平均侵袭细胞数分别为(17.26±5.48)个、(39.43±5.21)个;迁移细胞数分别为(30.49±7.74)、(62.20±7.51)个,实验组迁移及侵袭细胞数显著多于对照组(P<0.01)。结论LncRNA ANCR在胃癌患者肿瘤组织中表达显著增高,且与患者病情进展及细胞恶性程度密切相关,体外可促进胃癌干细胞标志物的表达,并增强细胞增殖及转移能力。
简介:摘要糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病患者常见的眼部并发症,而糖尿病黄斑水肿(DME)是DR患者视力丧失的主要原因,因此DME的早期诊治有重要临床意义。光相干断层扫描(OCT)检查可实现视网膜和脉络膜各个层次的高质量成像,已广泛应用于临床,可用于DME的诊断和治疗效果的长期随访。近年来研究发现DME在OCT图像上视网膜和脉络膜层次的各种相关改变,包括玻璃体黄斑界面异常、内层视网膜结构紊乱、视网膜内节-外节连续性破坏、外界膜连续性破坏、外层视网膜管型、高反射点、视网膜内囊样积液、中心凹下神经视网膜脱离、低光学反射点、中心凹下脉络膜厚度改变、脉络膜血管指数变化等。这些改变与DME的预后相关,因此可将其作为DME的生物学标志物,本文就此方面的研究进展进行综述。
简介:摘要目的探讨长链非编码RNA同源盒基因A11反义RNA(HOXA11-AS)在脑胶质瘤中的表达及生物学功能。方法首先分析HOXA11-AS在癌症基因组图谱(TCGA)计划数据库(689例)的低级别脑胶质瘤、胶质母细胞瘤以及GTEx数据库(255例)的正常脑组织样本中的表达情况。基于TCGA数据库,进一步分析HOXA11-AS在世界卫生组织(WHO)Ⅱ~Ⅳ级的脑胶质瘤样本中的表达情况。根据HOXA11-AS表达量的中位数分为高表达组和低表达组,并绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用log-rank检验比较HOXA11-AS低表达组与高表达组脑胶质瘤患者的生存差异。进一步的体外实验以人星形胶质细胞为对照组,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)实验验证HOXA11-AS在脑胶质瘤U251、U87及LN229细胞株中的表达。U87和LN229细胞株中分别使用携带HOXA11-AS cDNA序列的过表达慢病毒载体构建过表达HOXA11-AS的细胞株,使用空载慢病毒载体构建对照细胞株。U87和LN229细胞株中分别使用siRNA转染敲低HOXA11-AS的表达。进一步通过EdU增殖实验、细胞划痕实验和Transwell实验研究HOXA11-AS对胶质瘤细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响。结果HOXA11-AS在正常脑组织、低级别脑胶质瘤及胶质母细胞瘤中表达量的差异具有统计学意义(P<0.001)。TCGA数据库中,WHO Ⅲ、Ⅳ级脑胶质瘤的HOXA11-AS表达量均高于Ⅱ级脑胶质瘤(P<0.001)。全级别脑胶质瘤患者中,HOXA11-AS高表达组(n=344)的总生存期短于低表达组(n=345,P<0.001)。进一步的体外实验中,qRT-PCR检测结果显示,与对照组比较,U87组、LN229组及U251组HOXA11-AS的表达均升高(均P<0.001)。U87和LN229过表达组HOXA11-AS的表达均较其对照组上调(均P<0.001)。U87敲低组、LN229敲低组的HOXA11-AS表达均较其对照组下调(均P<0.001)。EdU增殖实验结果显示,U87和LN229过表达组的EdU阳性率分别高于U87和LN229对照组(均P<0.05);相反,U87敲低组较U87无义序列组、LN229敲低组较LN229无义序列组的EdU阳性率均下降(均P<0.001)。细胞划痕实验结果显示,U87和LN229过表达组的细胞迁移率分别高于U87和LN229对照组(均P<0.05);相反,U87敲低组较U87无义序列组、LN229敲低组较LN229无义序列组的细胞迁移率均下降(均P<0.001)。Transwell实验结果显示,U87和LN229过表达组的穿胶细胞数分别多于U87对照组和LN229对照组(均P<0.05);相反,U87敲低组较U87无义序列组、LN229敲低组较LN229无义序列组的穿胶细胞数均低(均P<0.05)。结论HOXA11-AS在脑胶质瘤中呈高表达,并可促进胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。