简介:目的观察上调白细胞介素10(IL-10)的表达对家兔慢性细菌性鼻窦炎动物模型上颌窦黏膜创伤修复的影响。方法以慢病毒(LV)为表达载体,上调IL-10的表达(LV-IL-10)。实验分3组:生理盐水注射组、LV-IL-10治疗组和LV-GFP注射组(GFP为绿色荧光蛋白)。制作家兔慢性细菌性鼻窦炎模型。在创伤前3d,各组上颌窦内侧壁黏膜下分别注射生理盐水、LV-IL-10和LV-GFP。于创伤后第3天和第10天取再生的上颌窦内侧壁黏膜,用实时聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验分别在mRNA水平和蛋白水平检测相关细胞因子的表达。苏木素-伊红(HE)染色和Masson三染色法观察创伤后第10天再生黏膜的形态特征。结果在创伤后第3天和第10天再生的上颌窦黏膜中,LV-IL-10治疗组的胶原沉积明显减少,炎症反应较轻,且IL-6以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原的mRNA表达水平明显下降。IL-6、IL-8以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原的蛋白表达水平也明显下降,但3组间再生的上颌窦黏膜中转化生长因子β(TGF-β)mRNA的表达无明显差别。结论在家兔慢性细菌性鼻窦炎创伤修复的动物模型中,上调IL-10的表达可以抑制再生黏膜中的炎症反应,减少胶原沉积,改善再生黏膜的组织重塑。
简介:目的:探索通过共焦激光眼底血管造影仪(HRA2)观测正常大鼠视网膜血管的形态和分布以及荧光标记的白细胞在眼底的运动情况的方法。方法:大鼠麻醉后散瞳并将其置于动物台上,荧光素钠血管造影观察大鼠视网膜血管的形态和分布,并照相和进行视频记录。另外,体外分离大鼠的外周血白细胞并用CFDA(6-carboxyfluoresceindiacetate)进行荧光标记,之后通过尾静脉将其回输进入同窝另一只大鼠的体内,观察白细胞在眼底血管的运动情况。结果:通过HRA2能够清楚而有效的观察到大鼠视网膜4级以上血管的形态和分布情况,并能够观察到白细胞在眼底血管中的各种运动状态。结论:建立了一种通过HRA2观测大鼠视网膜血管及白细胞运动的方法。
简介:研究内源性大麻素N-花生四氢酸氨基乙醇(anan-damide,AEA)对体外培养的牛眼小梁细胞细胞骨架及PGE2表达的影响。方法:对牛眼小梁细胞进行原代及传代培养,并行鉴定。对传3代的牛眼小梁细胞分别施加AEA浓度分别为0,0.1,1.0,10/μmol/L的无血清培养液,作用24h后提取细胞上清液,并将细胞置于倒置显微镜下摄像,计算机图像分析系统计算细胞面积。用ELISA法检测PGE2浓度的变化。结果:AEA可以产生明显的细胞舒张效应,呈浓度依赖性。而且在一定范围内可以成剂量依赖性的促进PGE2的表达。与对照组均有显著性差异(P〈0.05)。结论:AEA可引起小梁细胞的舒张和促进PGE2的释放。
简介:目的:观察不同浓度葛根素对体外培养的牛视网膜血管内皮细胞舒缩因子的影响。方法:取第8代牛视网膜血管内皮细胞用于实验。实验组中加入含不同浓度葛根素的培养液,对照组加入不含药物、无生长因子及血清的培养液。培养48h后用Westernblotting法测各组细胞eNOS及ET-1的表达。结果:与阴性对照组比较,葛根素组eNOS的相对表达量均升高(P〈0.01),且随着药物浓度的增加eNOS的表达也增加。葛根素组ET-1的相对表达量均降低(P〈0.01),且随着药物浓度的增加ET-1表达下降。结论:葛根素通过上调eNOS的表达,下调ET-1的表达,调节血管一氧化氮内皮素(NO/ET)的比值,从而发挥松弛视网膜血管平滑肌的作用。
简介:目的:观察多西环素对碱烧伤大鼠角膜炎症细胞浸润的抑制作用。方法:健康SD大鼠32只,随机分为对照组、多西环素组,每组16只大鼠。建立角膜碱烧伤模型后,多西环素组予3g/L多西环素眼液点眼,对照组予眼液溶媒点眼。分别于碱烧伤后第3,7,14,21d观察计算炎症指数,角膜取材后进行病理切片及炎症细胞计数,行ICAM-1的ELISA检测。结果:多西环素组各时间点结膜充血、角膜水肿较对照组轻,炎症指数均明显低于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。多西环素组各时间点炎症细胞计数少于对照组(P〈0.05)。多西环素组各时间点大鼠角膜的ICAM-1表达低于对照组(P〈0.05)。结论:多西环素可以抑制碱烧伤大鼠角膜的炎症细胞浸润,其机制可能是抑制ICAM-1的表达。
简介:目的:研究增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearanti-gen,PCNA)和胰岛素样生长因子Ⅱ(insulin-likegrowthfactor-Ⅱ,IGF-Ⅱ)在翼状胬肉中表达的关系。方法:应用免疫组织化学SABC法检测40例原发性翼状胬肉组织标本,10例正常结膜组织标本中PCNA和IGF-Ⅱ蛋白的表达情况。结果:翼状胬肉组中PCNA,IGF-Ⅱ表达均高于正常结膜组(P〈0.01),IGF-Ⅱ与PCNA蛋白表达之间的相关系数为0.731(P〈0.01)。结论:翼状胬肉为一种具有肿瘤潜能的增生性眼表疾病。IGF-Ⅱ通过促进细胞增殖参与了翼状胬肉的发生、发展。
简介:目的:构建表达小鼠CD4+T细胞钙支架蛋白AHNAK1的短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)慢病毒载体,并研究其对小鼠甲状腺相关性眼病(thyroid-associatedophthalmopathy,TAO)的抑制效应。方法:设计并筛选对AHNAK1具有良好干扰效力的shRNA序列,慢病毒载体包装干扰序列,感染小鼠CD4+T细胞,检测AHNAK1静默对T细胞功能的抑制作用,采用实验动物模型观察AHNAK1体内抑制甲状腺相关性眼病的效果。结果:成功筛选出具有良好干扰效力的shRNA,并包装入慢病毒。病毒滴度为1.0伊106TU/mL,转染慢病毒的CD4+T细胞展现出失能倾向,抑制炎症免疫反应;在动物模型中抑制T细胞中AHNAK1表达可以有效控制甲状腺眼病的发生发展,显著降低治疗组T细胞中IL-2、IL-1茁和IFN-酌的表达。结论:成功构建了表达小鼠AHNAK1shRNA的慢病毒,具有抑制T细胞分泌IL-2、IL-1茁和IFN-酌的表达效应,能够有效抑制甲状腺眼病的发生发展。
简介:目的:观察角膜缘干细胞培养液对血管内皮细胞增殖的影响。方法:分别培养角膜缘干细胞及球结膜上皮细胞,并通过免疫组化检测AE-5蛋白鉴别角膜缘干细胞。搜集两组培养细胞的上清液加入培养的人脐静脉血管内皮细胞中,并设立对照组。培养24h后通过MTT法检测细胞增殖情况并进行统计学分析。结果:角膜缘干细胞AE-5染色呈阴性,而球结膜上皮细胞为阳性。加入角膜缘干细球结膜上皮细胞和对照组培养液的血管内皮细胞MTT值分别为2.097±0.079,1.981±0.034和1.990±0.044。三组间有显著性差异(F=9.169,P=0.000)。加入角膜缘干细胞培养上清液的血管内皮细胞增殖活性明显高于其他两组(P=0.005和P=0.007)。结论:角膜缘干细胞培养液能够促进血管内皮细胞的增殖,这可能是角膜缘干细胞的特征。本研究从功能学角度为角膜缘干细胞理论提供更多的依据。
简介:AIM:ToexplorethemolecularmechanismsinlensdevelopmentandthepathogenesisofPetersanomalyinSmad4defectivemice.METHODS:Le-CretransgenicmouselinewasemployedtoinactivateSmad4inthesurfaceectodermselectively.PathologicaltechniqueswereusedtorevealthemorphologicalchangesoftheanteriorsegmentinSmad4defectiveeye.ImmunohistochemicalstainingwasemployedtoobservetheexpressionofE-cadherin,Ncadherinanda-SMAinanteriorsegmentofSmad4defectivemiceandcontrolmiceatembryonic(E)day16.5.Real-timequantitativepolymerasechainreaction(qPCR)wasperformedtodetecttheexpressionofSnail,Zeb1,Zeb2andTwist2inlensofSmad4defectivemiceandcontrolmiceatE16.5.RESULTS:ConditionaldeletionofSmad4oneyesurfaceectodermresultedincorneaidysplasia,iridocornealangleclosure,corneolenticularadhesionsandcataractresemblingPetersanomaly.LossofSmad4functioninhibitedE-cadherinexpressioninthelensepitheliumcellsandcorneaiepitheliumcellsinSmad4defectiveeye.ExpressionofN-cadherinwasupregulatedincorneaiepitheliumandcorneaistroma.BothE-cadherinandN-cadherinweredown-regulatedatthefuturetrabecularmeshworkregioninmutanteye.TheqPCRresultsshowedthattheexpressionofTwist2wasincreasedsignificantlyinthemutantlens(P<0.01).CONCLUSION:Smad4isessentialtoeyedevelopmentandlikelyacandidatepathogenicgenetoPetersanomalybyregulatingepithelial-mesenchymaltransition.Twist2canberegulatedbySmad4andplaysanessentialroleinlensdevelopment.
简介:·AIM:Toinvestigatechangesinimmunogenicityofcryopreservedlimbalstemcells.·METHODS:Cryopreservedlimbalstemcells,freshprimarylimbalstemcellsandblankcontrolswereinoculatedsubcutaneouslyinC57BL-6miceandthepercentageofCD25cellsinlimbalexplantswasdeterminedbyflowcytometryatday21postinoculation.Morphologicalstudieswereperformedbylightandelectronmicroscopyoflimbalexplantsections.·RESULTS:Thenumberofregionalandsystemiclymphocytesderivedfromcryopreservedlimbalstemcellswaslowerthanthatfromfreshprimarylimbalstemcells.·CONCLUSION:Lymphocytesderivedfromcryopreservedlimbalstemcellsshowedchangesinimmunogenicity,butthesignificanceisunknown.Thecryopreservationandthawingmethodsawaitfurtherstudy.·
简介:目的:探讨眼眶IgG4相关疾病(IgG4-RD)的临床病理特点。方法:收集整理23例35眼眼眶IgG4-RD患者的临床病理资料,对其进行组织学和免疫组织化学观察,总结其临床和病理特点。结果:眼眶IgG4-RD患者23例35眼,其中男8例9眼,女15例26眼,年龄28-72(平均52.1)岁。19例30眼来源于泪腺,4例5眼来源于眶内其他部位。以泪腺区肿胀或眼球突出就诊。单侧11例,双侧12例。病程1mo-10a,平均27mo。1例1眼6mo后复发。大体:灰白色结节状肿物,泪腺表面有很薄的纤维膜包绕。组织学特点:泪腺腺泡、导管组织严重萎缩甚至消失,被大量密集的淋巴细胞、浆细胞及淋巴滤泡替代,伴有不同程度的纤维化。免疫组织化学染色:23例35眼IgG4阳性浆细胞均〉50个/HPF,IgG4/IgG阳性浆细胞比值〉40%。结论:眼眶IgG4-RD主要发生于泪腺组织,通过组织学特点和免疫组织化学IgG4的表达可明确诊断。IgG4-RD应早期筛查、预防和治疗。
简介:AIM:Tocomparethespeedofvisualrecoveryfollowingmyopicthin-flapLASIKwithfourfemtosecondlasers.METHODS:Eighty-eighteyesof46patientswhowereconsecutivelyscheduledforbilateralLASIKwiththeIntraLaseFS60(Group1),FemtoLDVCrystalLine(Group2),WavelightFS200(Group3)andVisuMax(Group4)femtosecondlaserswereenrolledin.Monocularuncorrecteddistancevisualacuity(UDVA),best-correcteddistantvisualacuity(CDVA),refraction,contrastsensitivityandhigher-orderaberrations(HOAs)wereevaluatedat1,3d,1wkand1mopostoperatively.RESULTS:Sixteeneyes(72.7%)achieved20/16and8eyes(36.4%)were20/12.5at1dinGroup2,whichwassignificantlymorethanother3groups.At1wk,20eyes(90.9%)achieved20/16inGroups2and4.At1mo,20eyes(90.9%)achieved20/16inGroup2andGroup4,whichweresignificantlymorethanothertwogroups.Whileby1mo,thedifferenceoftheresidualsphericalequivalent(SE)wasnotstatisticallysignificantamong4groups(P=0.121).Theinductionofsphericalaberration(SA)weresignificantlylessforGroups2,3,4thanforGroup1onedayaftersurgery(P=0.015).Thedifferencesamong4groupswerenotstatisticallysignificantbeforeandaftersurgeryoneverytimepoints(allP>0.05).CONCLUSION:Thethin-flapLASIKprocedureusingtheFemtoLDVCrystalLineandVisuMaxfemtosecondlasershowfastervisualperformancerecovery.